Sat, 20 Apr 2024 RO   EN        Lista de proiecte » Tehnica imunochimica de analiza in faza omogena bazata pe nanoparticule functionalizate. Aplicatie pentru detectia contaminantului pesticidic acid 2,4-diclorofenoxiacetic din probe alimentare si de mediu Tehnica imunochimica de analiza in faza omogena bazata pe nanoparticule functionalizate. Aplicatie pentru detectia contaminantului pesticidic acid 2,4-diclorofenoxiacetic din probe alimentare si de mediu www.nipne.ro/proiecte/pn2/138-proiecte.html Acronim: HINANODET Autoritatea contractanta: Unitatea Executiva pentru Finantarea Invatamantului Superior, a Cercetarii, Dezvoltarii si Inovarii (UEFISCDI) Numar / Data contract: 98 / 2012 Program: Parteneriate in domeniile prioritare Director proiect: Ioan Dorobantu Parteneri: Universitatea "Alexandru Ioan Cuza" din Iasi (UAIC); Institutul National de Cercetare Dezvoltare pentru Tehnologii Izotopice si Moleculare Cluj-Napoca (INCDTIM) Data incepere / finalizare proiect: 2012-07-02 / 2016-12-31 Valoarea proiectului: 2000000 RON Rezumat: Metodele imunochimice cum ar fi tehnica imunochimica bazata pe enzime, antigen si anticorp legati de imunosorbent (ELISA) au devenit importante pentru analiza reziduurilor de pesticide datorita specificitatii mari de a detecta molecule din clasa anticorpilor. Aceste metode imunochimice au specificitate mare, sensibilitate (nanogram sau picogram) si precizie pentru detectia contaminantilor cu mase moleculare mici prezenti in mediul inconjurator. ELISA este o tehnica bazata pe disponibilitatea unui antigen nemarcat (e.g. pesticid) intr-un volum specific de solutie standard sau intr-o proba necunoscuta de a competitiona cu o cantitate limitata de situsuri de legatura a unui anticorp specific pesticidului de analizat. Obiectivul proiectului este dezvoltarea unei tehnici noi si inovative bazata pe nanoparticule functionalizate si anume tehnica ELISA in faza omogena (HnELISA) bazata pe nanoimunosorbenti pentru detectia contaminantului pesticidic acid 2,4-diclorofenoxiacetic din probe alimentare si de mediu. 2,4D este unul din cele mai utilizate pesticide din agricultura pentru controlul si distrugerea buruienilor care pot afecta culturile agricole. Prezenta acestui compus organoclorurat in produsele alimentare, transferul si contaminarea apelor freatice in ariile unde acesta este utilizat necesita analiza acestui compus pentru a stabili gradul de contaminare a produselor alimentare precum si a factorilor de mediu, apa, sol etc. Obiectivul proiectului este dezvoltarea tehnicii imunochimice cu calitati imbunatatite fata de tehnica ELISA traditionala existenta pe piata pentru detectia contaminantilor pesticidici din factori alimentari si de mediu. Se vor considera caracteristicile calitative cum ar fi sensibilitatea, precizia, stabilitatea nanoimunosorbentului si pretul scazut per analiza. Dezvoltarea tehnicii HnELISA va avea aplicatie practica in monitorizarea contaminantului pesticidic 2,4D din probe alimentare si de mediu. Obiective: 1. Obtinerea conjugatul imunogen acid 2,4-diclorofenoxiacetic-proteina. 2. Obtinerea anticorpului anti acid 2,4-diclorofenoxiacetic prin imunizare, preg?tirea si purificarea antiserurilor. 3. Obtinerea markerilor enzimatici acid 2,4-diclorofenoxiacetic-peroxidaz? si acid 2,4-diclorofenoxiacetic-fosfataza alcalina pentru tehnica ELISA si anticorpi anti acid 2,4-diclorofenoxiacetic cu peroxidaz? si anti acid 2,4-diclorofenoxiacetic anticorp-fosfataza alcalina. 4. Studii de cinetica a sistemului anticorp-antigen si evaluarea constantelor de asociere si de disociere si a constantei de afinitate a componentelor sistemului imunitar. 5. Obtinerea nanoimmunosorbentului (anticorp anti acid 2,4-diclorofenoxiacetic cuplat covalent pe suprafata nanoparticulelor) si caracterizarea fizico-chimica si structurala a nanoimunosorbentilor 6. Studii de cinetica si termodinamica de sistemului nanoimunosorbent-antigen si evaluarea parametrilor cinetici si termodinamici cum ar fi: constantele de adsorbtie si desorbtie, constanta de echilibru, energia liber?, entalpia si entropia a sistemului. 7. Obtinerea reactivilor auxiliari necesari in tehnica HnELISA. 8. Prepararea probei biologice, extragerea acidului 2,4-diclorofenoxiacetic din probe alimentare si de mediu cu diferiti solventi si evaluarea coeficientului de recuperare. 9. Elaborarea tehnicii HnELISA pentru dozarea acidului 2,4-diclorofenoxiacetic si prepararea reactivilor auxiliari necesari in aceast? tehnica 10. Obtinerea criteriile de validare ale tehnicii HnELISA: specificitatea, sensibilitatea, acuratetea, precizia si controlul calitatii prin compara?ie cu alte metode utilizate in analiza pesticidelor HPLC (cromatografie in lichide de inalt? performant?) si GC-MS (gaz cromatograf cuplat cu spectrometru de masa) ETAPELE PROIECTULUI SI DATELE DE PREDARE 1. Obtinerea conjugatelor imunogene pesticid-proteina si anticorpi antipesticid (2012-12-31) REZULTATE 2. Obtinerea markerilor enzimatici: pesticid-enzima si anticorp antipesticid-enzima si a nanoimunosorbentilor (2013-12-31) REZULTATE 3. Obtinerea nanoimunosorbentilor non magnetici si magnetici antipesticid-anticorp cuplat la nanoparticule si caracterizarea fizico-chimica si structurala a acestora (2014-12-31) REZULTATE 4. Proprietatile cinetice si termodinamice ale sistemelor nanoimunosorbenti-analit in prezenta unui marker enzimatic. Obtinerea reactivilor auxiliari pentru tehnica HnELISA si prelucrarea preliminara a probelor alimentare si de mediu (2015-12-31) REZULTATE 5. Elaborarea tehnicii HnELISA pentru dozarea acidului 2,4-diclorofenoxiacetic din probe alimentare si de mediu (2016-12-31) REZULTATE REZULTATE ARTICOLE PUBLICATE ECHIPA DE CERCETARE SI GRADUL DE IMPLICARE AL TINERILOR CERCETATORI Inapoi la Lista de proiecte English version of the project      Address: Str. Reactorului no.30, P.O.BOX MG-6, Bucharest - Magurele, ROMANIA Tel: +(4021) 404.23.00, Fax: +(4021) 457.44.40 2024 IFIN-HH. All rights reserved.